2019年12月底武漢發(fā)現(xiàn)新型冠狀病毒肺炎以來，感染確診病例和疑似病例數(shù)量仍在不斷上升，疑似病例的快速確診迫在眉睫。目前臨床上確診新型冠狀病毒肺炎病例，通用方式仍然是在臨床觀察的基礎(chǔ)上，采集痰液、咽拭子等呼吸道標本進行病毒核酸基因檢測，并作出病原學診斷。目前核酸檢測的準確性問題牽動了很多人的心，除去該病毒的一些*特征外，檢測過程中的每一個環(huán)節(jié)涉及的科學儀器和操作步驟都可能對結(jié)果產(chǎn)生影響。

   目前*狀病毒核酸檢測主要通過PCR檢測的方法，其對試驗場地、檢驗儀器及操作人員的要求都非常高，輕微的污染就可能對結(jié)果造成偏差。另外，對檢測樣本保存條件和設(shè)備也有很嚴苛的要求。并且，由于*狀病毒的傳染危險性，防護準備和后續(xù)的消毒處理對整個檢測實驗來說也異常重要。Cole-Parmer作為一家專業(yè)的科研儀器、設(shè)備、耗材供應(yīng)商，可以為*狀病毒核酸檢測提供從防護，采樣，樣本保存，檢測，消毒處理等各環(huán)節(jié)支持。相信可靠的儀器設(shè)備及防護消毒產(chǎn)品一定能為這場戰(zhàn)役中的檢測工作添磚加瓦。Cole-Parmer與你們一起并肩作戰(zhàn)！

Cole-Parmer相關(guān)儀器配置單（可點擊放大查看）

     以下是*病毒核酸檢測實驗的具體標準介紹，可供各位老師參考，其中涉及的儀器設(shè)備和耗材，疫情期間歡迎在微信平臺直接聯(lián)系我們，或者直接聯(lián)系您當?shù)氐匿N售或經(jīng)銷商。

*病毒核酸檢測實驗

                                                            一、樣本采集

      通常是在采集地——定點發(fā)熱門診進行樣本選取。樣本一般為鼻咽或口咽拭子、氣管吸出物、痰液等。鼻咽拭子居多（其陽性率非常高）

    在采集過程中，Cole-Parmer可為您提供防護服，護目鏡，鞋套，以及手套等防護用品。

第二步、樣本的包裝、保存與運輸

      通常采樣管需經(jīng)過3層包裝，即：自封袋+運輸罐+運輸箱。在2-4℃進行保存，（通常保存不能超過72小時），再通過UN2814感染性物質(zhì)運輸箱，由經(jīng)過生物安全培訓的專人，全身著防護用品運送轉(zhuǎn)運箱。

第三步、樣本的核酸檢測

   實驗地點：基因擴增實驗室

 實驗條件：二級生物安全實驗室（P2負壓實驗室）

 防護準備：檢測人員需進行三級防護的穿戴。按序依次穿戴好一次性帽子、醫(yī)用N95口罩、一次性防護服、一次性鞋套、一次性防水靴套、護目鏡和雙層乳膠手套。如有條件可加穿一次性隔離衣。                       

 檢測步驟：準備工作，核酸提?。ㄊ謩樱?，基因擴增與檢測，結(jié)果分析                   

1. 準備工作

 實驗儀器設(shè)備：*，水浴或烘箱，移液器

         首先檢查運輸罐是否嚴格密閉，然后取出罐內(nèi)的密封袋進行56℃下30分鐘的消毒滅活，滅活后可從密封袋內(nèi)取出采樣管對采集的樣品進行分裝、混勻。

     整個過程應(yīng)在*內(nèi)進行，滅活設(shè)備應(yīng)盡量選擇可放置于生物安全柜內(nèi)的小型設(shè)備以減少樣品進出安全柜內(nèi)的次數(shù)。

2.核酸提?。ㄊ謩樱?/span>

實驗儀器設(shè)備：*，移液器，振蕩器，金屬加熱器，微型離心機

      首先需要依據(jù)不同品牌試劑盒的要求進行裂解液的配置。然后，采用化學試劑法對核酸樣本進行裂解，樣品裂解前需經(jīng)過充分的振蕩混勻，如有必要可采用金屬加熱器于56℃下充分裂解病毒所釋放出的核酸。通過多次離心完成裂解產(chǎn)物的過濾收集。并且利用離心純化法對裂解后的核酸進行洗滌與回收。

3.基因擴增與檢測

實驗儀器設(shè)備：生物安全柜，PCR板離心機，實時熒光定量PCR儀

首先，需根據(jù)不同品牌試劑盒的要求將試劑盒內(nèi)的不同組分（引物，dNTP，聚合酶等）按各自所需的體積量進行配置，并充分離心混勻。然后將核酸樣本依次加入至每個PCR反應(yīng)管中，加蓋密閉后進行充分的混勻、離心。其次，將PCR反應(yīng)管置于實時熒光定量PCR儀中，按照試劑盒說明書的要求進行擴增參數(shù)的設(shè)置后即開始檢測。

4.結(jié)果分析

   通過計算出的CT值，依據(jù)檢測試劑盒廠家說明書的判斷標準進行判定，陽性、陰性或者不確定。

四、未測樣品的保存

    如樣本未能及時檢測，需將樣本于-70℃或以下進行保存。Cole-parmer專為您提供保存樣品的Cole-parmer超低溫冰箱。

五、消毒處理

          生物安全柜內(nèi)：對臺面、儀器、外層手套進行消毒，相關(guān)垃圾投入醫(yī)療垃圾桶中。并開啟紫外燈照射生物安全柜，時長應(yīng)不低于30分鐘。

      核酸檢測實驗室內(nèi)：對實驗室臺面、地面進行消毒，并開啟紫外照射燈進行空間消毒，時長應(yīng)不低于30分鐘。

          實驗人員：按自上而下、由內(nèi)而外的順序依次摘脫三級防護穿戴，并置于醫(yī)療垃圾桶內(nèi)。

醫(yī)療垃圾：所有與新型冠狀病毒相關(guān)的醫(yī)療垃圾需經(jīng)過濕熱高壓滅菌（121℃，30分鐘）后再作為普通的醫(yī)療垃圾處理，且垃圾袋上應(yīng)標注新型冠狀病毒醫(yī)療垃圾的相關(guān)信息。

 注意：實驗試劑、設(shè)備等需取得醫(yī)療器械注冊證，科學研究除外。